碱性果胶酯裂解酶基因工程菌pichia pastoris诱导表达条件初步优化

摘要：

在摇瓶水平上,采用单因素试验方法,对影响碱性果胶酯基因工程菌Pichia pastoris表达的主要因素进行研究.确定初始甲醇浓度、甲醇补加量和氮源酵母氮基(YNB)浓度3个主要影响因素的初步优化结果为5%、O.8%和1.3%.在此基础上,利用响应面分析法进一步优化.经优化,表达条件为初始甲醇浓度4.35%、甲醇补加量0.75%1:2及YNB浓度1.31%,优化后碱性果胶酯裂解酶(PL)表达量达到40.6 U/mL,较初始培养条件提高约2.3倍.同时,利用SDS-PAGE电泳对优化前后基因工程菌表达情况进行分析,结果同样表明胞外FI标蛋白PL表达量有明显增加,进一步证实条件优化后对目标蛋白PL分泌表达具有十分明显的促进作用.

关键词：碱性果胶酯裂解酶、基因工程菌、Pichiapastoris、表达、优化

所属期刊栏目：14

分类号：TQ925.3(其他化学工业)

资助基金：国家"863"资助项目2003AA322050

在线出版日期：2008-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：539-543