10.3321/j.issn:1006-687X.2008.01.021
产1,3-丙二醇温控重组大肠杆菌JM109(pBV220-yqhD-dhaB)的构建
1,3-丙二醇(1,3-PD)是一种重要的化工原料,其最重要的用途是作为合成聚酯PTT的单体.由于微生物发酵法生产1,3-PD具有操作简单,不易产生有毒副产物等特点,已得到广泛关注.本研究在前期工作的基础上,分别获得了来源于肺炎克雷伯氏菌的甘油脱水酶编码基因dhaB和来源于大肠杆菌的1,3-PD氧化还原酶同工酶编码基因yqhD,利用温控表达载体pBV220串联构建了重组质粒pBV220-yqhD-dhaB,将其转化大肠杆菌得到产1,3-丙二醇温控重组大肠杆菌JM109(pBV220-yqhD-dhaB).该重组菌在LB培养基中,30℃好氧培养12 h至对数生长中期,再经42℃好氧诱导发酵4 h,测得胞内甘油脱水酶和1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的酶活力分别达到260 U/mg蛋白和140U/mg蛋白;在含甘油40 g/L的发酵培养基中,30℃好氧培养12 h至对数生长中期,再经42℃好氧诱导发酵4 h,测得发酵液中1,3-PD含量为8.5 g/L.这将为进一步构建基因工程菌生产1,3-PD打下坚实的基础.图6表1参18
1、3-丙二醇、温控重组、大肠杆菌、温控表达载体
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Q785;TQ923(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金20676053;国家高技术研究发展计划863计划2006AA020103;江苏省青年科技创新人才学术带头人基金BK2006504;教育部长江学者和创新团队发展计划IRT0532
2008-06-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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