一种改进的SON-PCR基因扩增方法

摘要：

单侧寡聚核苷酸嵌套PCR (single oligonucleotide nested PCR, SON-PCR)是一种简便易行的由已知序列克隆其侧翼序列的方法,但该法的第二轮PCR反应引发效率低,而且得到的产物两端含相同的引物序列,不可直接测序.针对该问题,将第二轮PCR改进为两段式扩增,即先以单侧嵌套引物引发5′端做选择性线性扩增,然后再加入第一轮引物特异引发3′端,使特异性和效率都得到很大提高,并可用PCR产物直接测序.分别用已报道的和改进的SON-PCR法克隆Botrytis cinerea羟甲基戊二酰CoA还原酶基因侧翼序列,后者获得期望结果,证明改进的SON-PCR方法行之有效.国内外尚未见同类报道. 图4 参7

关键词：SON-PCR、改进的SON-PCR、基因扩增

所属期刊栏目：12

分类号：Q3(遗传学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划;中国科学院重要方向项目资助课题KSCX2-YW-G-016

在线出版日期：2007-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：857-860