日本沼虾(Macrobrachium nipponense)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶初步纯化及部分性质

摘要：

以日本沼虾内脏为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、 DEAE-32离子交换柱层析和Sephadex G-100分子筛柱层析纯化,获得比活力为3 000 U mg-1、纯化倍数为8.88倍的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶制剂(NAGase).以对-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学,结果表明,酶的最适pH为6.0,最适温度为53 ℃.该酶在pH 4.5～9.3区域较稳定,当pH＞9.3很快失活;在50 ℃以下处理30 min,酶活力保持稳定,高于50 ℃,酶稳定性较差,75 ℃酶完全失活.酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为0.165 mmol L-1,最大反应速度Vm为6.55 μmol L-1 min-1.酶催化pNP-β-D-GlcNAc反应的活化能为63.55 kJ mol-1. 图5 表1 参16

关键词：日本沼虾、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)、分离纯化、性质

所属期刊栏目：12

分类号：Q95(动物学)

资助基金：国家自然科学基金30571257;福建省教育厅科研项目2005K32

在线出版日期：2007-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：804-808