利用TAIL-PCR和RT-PCR技术克隆云芝植酸酶基因

摘要：

从采绒革盖菌(Coriolus versicolor,常被称为杂色云芝)中筛选到产植酸酶基因.根据植酸酶基因的保守序列设计引物P1、P2,从云芝中分离克隆植酸酶基因的片段.再在分离到的已知序列的5'端和3'端设计嵌套的特异引物SP1、SP2、SP3和SP1'、SP2'、SP3',利用TAIL-PCR技术进行分离已知序列的侧翼序列.结合Blastn、ORF和Primer 5.0软件,在侧翼序列上设计特异引物P3、P4,最终从云芝中分离克隆到全长的植酸酶基因B4.再在B4序列的基础上设计引物phyP rt1、phyP rt2,利用这两个引物通过RT-PCR技术从云芝中克隆到全长的植酸酶基因B5.通过分析,分离克隆到的植酸酶基因可能是新的基因.图4参12

关键词：云芝、植酸酶、TAIL-PCR、RT-PCR

所属期刊栏目：12

分类号：Q94(植物学)

资助基金：国家自然科学基金30060054;30371000;广东省自然科学基金032239;华南农业大学校科研和教改项目5100-k03003

在线出版日期：2006-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：618-622