甲基对硫磷降解菌GFP标记菌株的构建

摘要：

用Sau3AⅠ酶切甲基对硫磷降解菌DLL-1总DNA,与BamHⅠ酶切的启动子探针载体pRobe-GFP酶连,转化E.coliDH5α,在选择性平板LB(Ampr)上从大约1×104个菌落筛选到50个含启动子片断的阳性克隆.挑选其中一个阳性克隆,将启动子片断克隆到pIJ2925和pBBR-MCS2上构建成重组质粒pIJGFP和广宿主标记载体pBBRGFP.然后将pIJGFP载体上的启动子片断克隆到广宿主载体pTR102上,获得第二个广宿主标记载体pTRGFP.将pTRGFP和pBBRGFP通过三亲接合分别标记于DLL-1得到两株标记菌,即DLLTR和DLLBR.通过激光共聚焦显微镜观察和软件Lasersharp version 3.2分析发现pTRGFP在E.coli中表达很强而在DLL-1中表达很弱,而pBBRGFP正好相反. 图5 表2 参12

关键词：甲基对硫磷降解菌、启动子、标记载体、标记菌、GFP

所属期刊栏目：10

分类号：X172+Q782(环境生物学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划SZ0308,2001AA21412,2002AA246081

在线出版日期：2005-01-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：778-781