10.3321/j.issn:1006-687X.2003.02.003
青稞β-1,3-葡聚糖酶II基因启动子的克隆分析及表达载体的构建
根据本实验室克隆并公布的藏青稞β-1,3-葡聚糖酶II(BGH II)基因序列,以藏青稞QB09基因组DNA为模板,构建DNA步移文库,并通过步移技术克隆出BGH II起始密码子上游调控序列BGHP. 鉴定和分析表明,BGHP具备大多数高等植物启动子的保守元件,预测它对BGH II基因的表达具有一定的作用.为鉴定BGH II基因的基本启动子元件,将基因5′侧翼序列做缺失片段分析,利用PCR方法从BGHP中得到3个不同大小两端带有Hind Ⅲ、BamHⅠ酶切位点的片段BGHP1、BGHP2和BGHP3,定向插入载体pMGFP4(pBI221改建,报告基因为GFP)中,取代原有的CaMV35S启动子,构建了由驱动报告基因GFP的植物表达载体BGHPV1、BGHPV2和BGHPV3,用于大麦的遗传转化,为进一步研究其功能奠定了基础. 图5 表1 参15
启动子、青稞、β-1、3-葡聚糖酶基因、DNA步移技术、表达载体
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Q785:S512.3(基因工程(遗传工程))
国家基础性工作项目;教育部高校骨干教师资助计划
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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