假单孢菌碱性木聚糖酶分子活性部位的研究

摘要：

应用多种化学修饰剂对假单孢菌G6-2产生的碱性木聚糖酶A(XynA)进行了修饰.结果表明,作用于色氨酸和谷氨酸(和/或天冬氨酸)的试剂NBS(N-Bromosuccinimide)和WRK(N-Ethyl-5-phenylisoxazolium-3-sulfonate)可分别使酶活明显降低,而作用与丝氨酸、精氨酸、酪氨酸的试剂对酶活无明显影响.XynA的化学修饰动力学分析表明,每个酶分子中有1个色氨酸残基和1个谷氨酸(或天冬氨酸)残基对酶的活性特别重要.NBS的滴定结果表明,木聚糖的加入可使1个色氨酸残基被保护,木聚糖对NBS的荧光猝灭有22%的保护作用.0.2%的燕麦木聚糖可完全阻止NBS对XynA的修饰作用;而即使2%的木聚糖也不能阻止WRK的灭活作用.NBS可使XynA的Km增大4倍,而WRK可使其Vmax降低三分之二.这些结果表明,色氨酸和谷氨酸(或天冬氨酸)残基位于XynA的活性部位,且前者位于XynA的底物结合中心,后者位于酶的催化中心.图6表1参14

关键词：碱性木聚糖酶、化学修饰、活性中心

所属期刊栏目：8

分类号：Q556:Q939.112(酶)

资助基金：国家自然科学基金39970392

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：520-524