龙眼miR408与DlLAC12克隆及其在球形胚发生和非生物胁迫下的表达分析

摘要：

为探讨miR408及靶基因DlLAC12在龙眼球形体细胞胚诱导及不同非生物胁迫下的表达模式,采用miR-RACE PCR和Tail-PCR克隆获得pri-miR408 cDNA和转录起始位点、dlo-miR408 gDNA、靶基因DlLAC12 cDNA及启动子pro-MIR408序列.研究结果显示:dlo-pri-miR408 cDNA、gDNA全长均为706 bp,5'端转录起始位点为胞嘧啶(C).DlLAC12 cDNA全长为1 725 bp,pro-MIR408全长为1 532 bp.pro-MIR408序列上存在ABA、GA3、JA等激素信号传导顺式作用元件和响应光、低温胁迫等相关元件.qRT-PCR结果显示,dlo-miR408-3p随外源添加的蔗糖浓度、Cu2+浓度及培养温度的变化呈现动态表达;而dlo-miR408-5p1对蔗糖不敏感,在铜离子失衡和低温时下调表达.dlo-miR408-3p与DlLAC12负调控模式能响应高浓度ABA(≥500 μmol·L-1)处理,而不同浓度GA3处理下二者表达模式一致.dlo-miR408-3p与DlLAC12在球形胚诱导不同天数呈现负调控,说明在球形胚诱导过程发挥作用.试验表明,dlo-miR408与靶基因DlLAC12可参与龙眼体胚发生与非生物胁迫响应.

关键词：龙眼、体胚发生、miR408、DlLAC12、非生物胁迫

所属期刊栏目：49

分类号：S667.2(果树园艺)

资助基金：国家自然科学基金;福建省高原学科建设经费项目;福建农林大学创新基金;福建农林大学创新基金;福建农林大学创新基金;福建农林大学创新基金

在线出版日期：2022-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共17页

页码：1866-1882