10.16420/j.issn.0513-353x.2019-0610
杏CCD1和CCD4启动子克隆及顺式作用元件分析
以‘轮台小白杏’杏果实为材料,根据转录组数据库中的CCD1和CCD4基因片段,通过基因组步移法克隆了两个启动子pPaCCD1和PaCCD4,获得了长度分别为2 233和1 838 bp的启动子序列.利用PlantCare数据库对启动子序列的顺式作用元件进行预测分析,结果表明两个启动子均含有多个光响应、脱落酸和茉莉酸甲酯等共有顺式作用元件,此外,PaCCD1启动子中含有刺激诱导和种子特异性调控等响应元件,PaCCD4启动子中含有赤霉素、低温和增强转录水平等响应元件,这暗示PaCCD1和PaCCD4的表达可能受光信号、激素和胁迫等多种信号的共同调节.为进一步确定其启动子核心区,基于基因结构特征与顺式作用元件的分布情况,分别构建两个不同长度缺失启动子与GUS基因融合的表达载体并瞬时转化烟草叶片.GUS活性检测发现,在PaCCD1的启动子上游-2 174~-1 700 bp、-1 700~-1 200bp、-1 200~-600 bp区间内均包含影响启动子活性的顺式作用元件;PaCCD4启动子在上游-1 740~-1 200 bp和-1 200~-600 bp这两个区间内含有顺式作用元件,随着启动子片段的缺失,PaCCD1和PaCCD4的GUS活性逐渐减弱.PaCCD1的启动子核心区域在-1 200~2 174bp区段内,PaCCD4的启动子核心区域在-1 200~1 740 bp区段内.
杏、CCD1、CCD4、启动子、功能分析
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S662.2(果树园艺)
国家自然科学基金项目31872046
2020-07-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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