蚕豆中三叶草黄脉病毒编码的NIa-Pro蛋白亚细胞定位特征初步研究

摘要：

三叶草黄脉病毒(Clover yellow vein virus,C1YVV)是马铃薯Y病毒属(Potyvirus)的重要成员.核内涵体a蛋白酶(Nuclear Inclusion a Protease,NIa-Pro)是一种由Potyvirus病毒编码的具有蛋白水解酶活性的蛋白,在病毒与寄主互作过程中参与多聚蛋白切割等多种功能的行使.选择2018年在江苏发现的C1YVV蚕豆分离物作为研究对象,对其NIa-Pro蛋白基因进行了克隆和序列测定,结果显示其全长729 bp,编码1个24.3 kD的蛋白.为进一步研究其亚细胞定位特征,构建了融合YFP荧光标签的重组表达载体YFP-NIa-Pro,利用农杆菌浸润法接种本氏烟(Nicotiana benthamiana).激光共聚焦显微镜观察结果显示,浸润处理后本氏烟叶片表皮细胞的细胞质及细胞核都有较强的荧光信号.取浸润区样品通过Western-blot检测,结果显示YFP-NIa-Pro在本氏烟叶片中正常表达.这些结果初步表明C1YVV编码的NIa-Pro在细胞质和细胞核均有分布.

关键词：蚕豆、三叶草黄脉病毒、核内涵体a蛋白酶、亚细胞定位

所属期刊栏目：47

分类号：S643

资助基金：国家重点研发计划项目;国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目;国家自然科学基金项目;江苏省农业自主创新基金项目[CX182005;江苏现代农业特粮特经产业技术体系集成创新中心项目;江苏省农业科学院基金项目

在线出版日期：2020-05-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：153-160