柑橘鳞皮病毒RT-LAMP检测方法的建立与应用

摘要：

根据NCBI数据库柑橘鳞皮病毒(Citrus psorosis virus,CPsV)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因序列设计了4组特异性引物,通过一系列优化,筛选并获得1组特异性引物.以感染CPsV的柑橘叶片总RNA为模板,采用一步法RT-LAMP(One-step reverse transcription loop-mediated isothermal amplification),在60℃下反应60 min,对扩增产物进行琼脂糖电泳分析,同时测定其特异性和灵敏度.结果 表明,建立的RT-LAMP检测方法能特异性扩增CPsV,灵敏度为RT-PCR的10倍.用RT-LAMP方法对87个田间样品进行检测,发现有5个样品感染了CPsV,其检测结果与RT-PCR法一致.RT-LAMP法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点,适合对CPsV样品的快速检测与鉴定.

关键词：柑橘、柑橘鳞皮病毒、RT-LAMP、检测

所属期刊栏目：46

分类号：S666(果树园艺)

资助基金：国家重点研发计划政府间国际科技创新合作重点专项2017YFE0110900;重庆市基础科学与前沿技术研究专项cstc2017jcyjBX0016;重庆市研究生科研创新项目CYS18133,CYS17086

在线出版日期：2019-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1409-1416