CRISPR/Cas9介导柑橘CsLOB1基因启动子的多位点编辑

摘要：

为了获得CsLOB1启动子较大片段删除的突变体,利用CRISPR/Cas9技术对CsLOB1启动子进行多位点编辑.通过在CsLOB1启动子的EBEpthA4区域及其上、下游设计不同的靶标位点,构建了2个植物表达载体pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites,分别对CsLOB1启动子同时进行2个位点和3个位点的编辑.测序结果表明pCas9CsLOB1:2sites和pCas9CsLOB1:3sites的基因编辑效率分别为64.7％和80.0％,突变体植株在2个sgRNA之间发生了DNA片段的删除.进一步的分析发现,不同的sgRNA具有不同的突变效率,其差异是由于不同的sgRNA对CsLOB1-识别和结合能力的差异造成的.本结果表明对CsLOB1启动子进行多位点编辑可以获得删除较大DNA片段的突变体.

关键词：柑橘、CRISPR/Cas9系统、CsLOB1、多位点、基因编辑

所属期刊栏目：46

分类号：S666(果树园艺)

资助基金：南方山地园艺学教育部重点实验室开放课题项目;国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目CARS-26;重庆市自然科学基金项目cstc2017jcyjBX0020

在线出版日期：2019-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：337-344