葡萄病毒A实时荧光定量RT-PCR检测技术的建立及应用

摘要：

根据文献报道和GenBank已登录序列设计引物建立了葡萄病毒A(Grapevine virus A,GVA)SYBR Green Ⅰ染料法实时荧光定量RT-PCR检测技术体系.该技术标准曲线循环阈值与模板浓度呈现良好线性关系,扩增效率为99.2％,决定系数为0.999,可特异性检测GVA,灵敏度高(达常规RT-PCR的100倍),重复性好.对不同季节、不同品种以及不同部位葡萄样品(嫩叶、嫩叶柄、老叶、老叶柄、卷须和休眠枝条)中GVA的检出率普遍高于常规RT-PCR.不同季节间比较,对秋、冬季样品检测效果最好,除嫩叶外其余部位检出率均达100％,春夏季检出率为10％～100％.不同部位间比较,老叶柄和休眠枝条检测效果最好,检出率均达100％,其次为老叶(80％～ 100％),其余部位样品检出率为10％～ 100％.在大量田间样品检测中,休眠枝条样品检测结果与常规RT-PCR一致,而秋季老叶柄样品检出率明显高于常规RT-PCR.

关键词：葡萄、葡萄病毒A、检测、实时荧光定量RT-PCR、常规RT-PCR

所属期刊栏目：45

分类号：S663.1(果树园艺)

资助基金：国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目CARS-29-bc-1

在线出版日期：2019-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：2243-2253