柑橘黄化脉明病毒基因组的长链RT-PCR扩增、克隆及序列分析

摘要：

为了建立柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)基因组长链RT-PCR扩增体系,构建其全长cDNA克隆,为深入了解CYVCV分子特性及其致病机理奠定基础.根据GenBank中CYVCV基因组序列和5'RACE扩增结果设计引物.以感染CYVCV的代代酸橙(Citrus aurantium ‘Daidai’)植株总RNA为模板进行长链RT-PCR扩增,得到CYVCV全基因组cDNA,克隆至pGEM-Teasy载体,并进行序列测定与分析.结果显示,建立了一步扩增CYVCV全基因组的长链RT-PCR方法,扩增出约7.5 kb的目标片段;所获得的4个CYVCV全基因组cDNA序列与GenBank中已登录的相关毒株的核苷酸序列同源性为93％～ 99％.

关键词：柑橘黄化脉明病毒、RACE、全长cDNA、长链RT-PCR

所属期刊栏目：44

分类号：S666(果树园艺)

资助基金：国家公益性行业农业科研专项201203076;重庆市两江学者计划项目;重庆市基础及前沿研究项目CSTC2014jcyjA80033;中央高校基本科研业务专项XDJK2017B024

在线出版日期：2017-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：944-952