羽衣甘蓝ARC1的抗体制备及蛋白表达分析

摘要：

ARC1是芸薹属植物自交不亲和(Self-incompatibility,SI)信号复合体下游传递因子,特异性地介导SI信号传递.利用原核表达系统对羽衣甘蓝(Brassica oleracea var.acephala)ARC1的全长蛋白(1 ～ 663 aa,BoARC1-F)、UND结构域蛋白(1～279aa,BoARC1-N)和ARM结构域蛋白(361～663aa,BoARC 1-C)进行重组表达.SDS-PAGE结果显示这3种蛋白分别在分子量68、33和38 kD处特异性地诱导表达.利用Ni2+-NTA树脂亲和层析技术获得重组蛋白.将BoARC 1-C蛋白免疫小鼠并通过细胞融合技术制备单克隆抗体,获得2株单克隆抗体.交叉反应试验结果显示制备的单克隆抗体具有ARC1识别特异性.通过免疫印迹技术检测BoARC1在不同组织和不同发育阶段柱头中的表达,结果显示BoARC1特异性地在羽衣甘蓝柱头中表达,而且在开花阶段的柱头表达量最高.

关键词：羽衣甘蓝、自交不亲和、ARC1、抗体制备、蛋白表达

所属期刊栏目：44

分类号：S681.9(观赏园艺（花卉和观赏树木）)

资助基金：中央高校基本科研业务费专项基金项目2572015AA28,DL13CA13;国家自然科学基金项目30900115,31070275

在线出版日期：2017-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：355-363