过量表达杜鹃红山茶CaAPX1的烟草耐热性提高

摘要：

根据山茶(Camellia japonica)同源序列设计特异性引物,利用同源克隆和3’,5’-RACE技术,从杜鹃红山茶(C.azalea)嫩叶组织中克隆出抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)基因,命名为CaAPX1(GenBank登录号:KP635267),基因全长1 097 bp,开放阅读框753 bp,编码250个氨基酸.实时荧光定量分析发现,CaAPX1在4种不同的山茶中均得到表达,其中较耐热的微花连蕊茶(C.minutiflora)表达量最高,其次是中等耐热的杜鹃红山茶和‘耐冬’山茶(C.japonica‘Naidong’),最低的为耐热性较差的‘恨天高’云南山茶(C.reticulata‘Hentiangao’).结果表明该基因的表达量高低与测试物种的耐热性有关.CaAPX1在杜鹃红山茶4种组织中均得到表达,表达量由高到低依次为:叶片、花蕾、种胚、花芽,其中叶片表达量高达其他组织的1.29 ～ 4.26倍.CaAPX1转基因烟草分析表明,过量表达CaAPX1后,APX酶活性提高了2.58～3.81倍,抗坏血酸(Ascorbate,AsA)含量也提高了2.67 ～ 3.56倍,并且转基因烟草植株及其种子的耐热能力也提高.

关键词：山茶、杜鹃红山茶、耐热性、表达分析、转基因烟草

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分类号：S68(观赏园艺（花卉和观赏树木）)

资助基金：引进国际先进林业科学技术项目2014-4-16;连云港市第五期‘521工程’项目;宁波市农业科技专项项目2014C11002

在线出版日期：2017-01-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2203-2213