柑橘脉突病毒实时荧光定量RT-PCR检测体系的建立与应用

摘要：

为了快速、灵敏地检测柑橘脉突病毒(Citrus vein enation virus,CVEV),通过设计特异性引物(EVqF4/EVqR4),优化反应条件,建立了CVEV的实时荧光定量RT-PCR检测体系.该方法特异性良好;检测灵敏度比常规RT-PCR高100倍;标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.992,扩增效率101.8％;检测组内和组间变异系数均小于2.85％,重复性较好.利用所建立的实时荧光定量方法对柑橘植株进行检测发现,‘代代酸橙’和‘象山红’植株中CVEV分布不均匀,其中根部病毒滴度最高,分别为162.52和45.32拷贝·ng-1 RNA,皮及叶部病毒滴度相对较低.

关键词：柑橘脉突病毒、实时荧光定量RT-PCR

所属期刊栏目：43

分类号：S666(果树园艺)

资助基金：农业部公益性行业农业科研专项经费项目201203076;重庆市基础及前沿研究项目CSTC2014jcyjA80033;重庆市两江学者计划项目

在线出版日期：2016-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1613-1620