转基因柑橘外源基因拷贝数的实时荧光定量PCR检测

摘要：

为分析转基因柑橘中外源基因整合拷贝数,基于实时荧光定量PCR法,建立通用、准确、简便的转基因柑橘外源基因拷贝数检测体系,利用该体系成功检测了150个转基因柑橘单株系外源基因整合拷贝数.结果表明,转基因柑橘中外源基因整合最低拷贝数为1,最高达5个,其中1、2和≥3拷贝的单株数分别占总数的40.0％、18.0％和42.0％;采用Southern blot技术进行检测,结果基本一致,极少数单株经实时荧光定量PCR分析的拷贝数比Southern blot检测的数值高.说明本研究建立的实时荧光定量PCR方法检测转基因柑橘外源基因整合拷贝数更加准确可靠.拷贝数为1～2的转基因株系可作为将来开展转基因目标性状研究及转基因生物安全性评价有利用价值的试验材料.

关键词：柑橘、实时荧光定量PCR、转基因、拷贝数、Southern blot

所属期刊栏目：43

分类号：S666(果树园艺)

资助基金：国家自然科学基金项目31272150;国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目CARS-27;国家科技支撑计划项目2012BAD19B06;重庆市基础与前沿研究计划项目cstc2015jcyjA80042;中央高校基本科研业务费专项XDJK2014C129;中央高校基本科研业务费专项XDJK2014A018;重庆市集成示范重点项目cstc2015jcsf-kjfp80027

在线出版日期：2016-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1186-1194