柑橘黄化脉明病毒DTBIA检测方法的建立

摘要：

通过柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)兔源多克隆抗体(一抗)及Ap标记羊抗兔IgG(二抗)最佳稀释度等条件优化建立了CYVCV直接组织点免疫(Direct tissue blot immunoassay,DTBIA)检测方法,并对其特异性、稳定性和检测效果进行了评价.试验结果显示,一抗、二抗稀释比例分别为1∶8 000和1∶2 000时,DTBIA检测CYVCV效果最佳;应用所建立的DTBIA方法对携带9种不同柑橘病害的柑橘样品进行检测时,仅携带CYVCV样品呈阳性反应;柑橘黄脉病样品植物组织印迹后,印迹膜于4℃保存,90 d内可进行有效的CYVCV检测;对田间不同柑橘品种利用DTBIA法检测CYVCV,其结果与一步法RT-PCR符合率为97.92％.可见,该CYVCV检测方法快速、简便、稳定、特异及可靠,可推广应用于田间快速检测CYVCV,对于防范柑橘黄化脉明病毒大面积传播流行具有重要的现实意义.

关键词：柑橘、柑橘黄化脉明病毒、直接组织点免疫法

所属期刊栏目：42

分类号：S666(果树园艺)

资助基金：农业部公益性行业农业科研专项201203076;重庆市两江学者计划项目;中央高校基本科研专项SWU113097;重庆市基础及前沿研究项目CSTC2014JCYJA8033

在线出版日期：2015-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1843-1850