柑橘黄化脉明病毒RT-LAMP检测方法的建立

摘要：

柑橘黄脉病由柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)引起,是中国近年来新发生的一种柑橘病害.根据CYVCV的外壳蛋白基因序列设计了一组特异性引物,经过一系列条件优化,建立了该病毒的RT-LAMP检测方法.结果显示该方法能特异扩增CYVCV,与其他6种柑橘病原物(柑橘衰退病毒、温州蜜柑萎缩病毒、鳞皮病毒、柑橘裂皮病类病毒、柑橘碎叶病毒和柑橘黄龙病菌)不发生反应;灵敏度为RT-PCR的10倍;田间样品的检出率为63.33％,与RT-PCR的结果一致,适用于田间样品的检测.在产物中加入荧光染料SYBR GreenⅠ直接用肉眼观察就可判断样品是否感染CYVCV,可省去电泳分析的时间.该方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点.

关键词：柑橘黄化脉明病毒、RT-LAMP、检测

所属期刊栏目：42

分类号：S666(果树园艺)

资助基金：国家公益性行业农业科研专项201203076-01;中央高校基本科研业务费项目XDJK2012C078

在线出版日期：2015-06-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：997-1002