10.16420/j.issn.0513-353x.2014-0757
罗汉果葡萄糖基转移酶基因SgUGT4的克隆及表达研究
以授粉后70 d的罗汉果为材料,采用RT-PCR和RACE技术克隆到一个葡萄糖基转移酶基因,命名为SgUGT4.该基因cDNA全长1 726 bp,包含完整的开放阅读框1 344 bp,编码447个氨基酸.构建pET32a-SgUGT4原核表达载体,转化大肠杆菌Rossetta-gami (DE3),经IPTG诱导获得分子量约65kD的目的基因融合蛋白.系统进化分析表明,SgUGT4与具有罗汉果苷合成活性的拟南芥和甜叶菊葡萄糖基转移酶AtUGT73C3、AtUGT73C5、AtUGT73C6、SrUGT73E1聚在一个亚家族.实时荧光定量PCR检测表明,SgUGT4在罗汉果甜苷Ⅴ主要积累部位果肉的表达量高于茎、叶、花和果皮,在根和种子中几乎不表达;果实发育40～50 d,甜苷Ⅴ开始积累,SgUGT4表达量则逐渐升高,50d时急剧上升;甜苷Ⅴ含量越高的品种,SgUGT4表达量也越高.SgUGT4可能在罗汉果甜苷Ⅴ生物合成过程中发挥作用.
罗汉果、葡萄糖基转移酶、基因克隆、原核表达、时空表达
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S576
国家自然科学基金项目30860379,31400275;国家科技支撑计划项目2011BA101B03;广西自然科学基金项目2013GXNFSBA019170;广西卫生厅中医药科技专项GZPT1235
2015-05-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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