蜡梅胚胎晚期丰富蛋白基因CpLEA的克隆及表达分析
从蜡梅(Chimonanthus praecox)花cDNA文库中获得了1个胚胎晚期丰富蛋白(LEA)基因的cDNA全长序列,命名为CpLEA(GenBank登录号:JF412788),该基因cDNA含有一个273 bp编码91个氨基酸的开放阅读框,从蜡梅基因组DNA中扩增该基因发现,该基因含有两个大小分别为35bp和707 bp的内含子.生物信息学分析显示,CpLEA的编码蛋白含有4个胚胎晚期丰富蛋白第3族LEA蛋白特有的11个氨基酸的基元重复序列,进化树分析表明该编码蛋白与榛子的LEA蛋白亲缘关系最近.通过原核表达获得了与预期大小一致的融合蛋白.实时荧光定量PCR分析表明,该基因在蜡梅成熟种子中表达量最高,在根中几乎不表达;在盛开期花的各个部位中又以雌蕊中的表达量最高;在花发育早期表达量较高,随后下降并保持相对稳定,在衰败期突增并达到最高;检测该基因在脱落酸(ABA 50μmol.L-1)、低温(4℃)、高温(42℃)、干旱(30% PEG6000)和高盐(NaCl 1 mol.L-1)5种外源非生物胁迫因子作用下的表达特性.结果表明,该基因能够被ABA、低温、高温、PEG和NaC1诱导表达,并在随后的时间内呈现出不同的表达模式.表明CpLEA可能在蜡梅花发育和多种非生物胁迫响应中发挥作用.
蜡梅、胚胎晚期丰富蛋白、原核表达、基因表达分析
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S685.17(观赏园艺(花卉和观赏树木))
国家自然科学基金项目31370698,31070622;中央高校基本科研业务费专项资金项目XDJK2013A004
2014-09-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1663-1672