甜瓜α-甘露糖苷酶基因促进果实成熟功能的瞬时表达分析

摘要：

为了研究α-甘露糖苷酶(α-Man)基因在甜瓜果实成熟过程中的功能,应用农杆菌介导的瞬时表达技术,分别将含有甜瓜α-甘露糖苷酶基因超表达载体pPZP221-Man、两个RNAi载体pART-Man1和pART-Man2的农杆菌菌液注射至甜瓜绿熟期果实,通过观察果实成熟表型初步鉴定该基因的功能.结果表明,菌液浓度OD600=1.2时果实表型比率最高,在果实蒂部表型居多.α-甘露糖苷酶活性测定结果显示,与非注射部位相比,注射超表达载体部位的组织α-甘露糖苷酶活性较高,而注射RNAi载体的组织α-甘露糖苷酶活性较低.RT-qPCR结果显示,与非注射部位相比,注射pPZP22 l-Man的部位α-Man基因表达约是对照的1.2倍,而注射pART-Man1和pART-Man2的部位α-Man基因的表达均有所下降,分别是对照的47％和37％.同时对甜瓜果实成熟相关的6个候选基因在注射部位的表达情况进行了分析,结果显示,这些基因在注射超表达载体的果实部位均上调表达;而在注射两种RNAi载体的果实部位均下调表达.这些结果表明甜瓜α-甘露糖苷酶基因在果实成熟过程中具有促进成熟的作用.

关键词：甜瓜、α-甘露糖苷酶基因、基因瞬时表达、RT-qPCR

所属期刊栏目：41

分类号：S652(瓜果园艺)

资助基金：国家自然科学基金项目31101559

在线出版日期：2014-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1601-1608