开花负调因子芥菜BjSVP与甘蓝BoFLC的异源互作研究

摘要：

为阐明开花负调因子BjSVP(源于种子春化型作物芥菜)与BoFLC(源于绿体春化作物甘蓝)异源聚合后在开花调控路径中的互作机制,从芥菜酵母重组质粒pGADT7-BjSVP分别亚克隆含MI、MIK、K、IKC、KC、IK、IK1L1K2L2、IK1L1K2、IK1L1、IK1、I结构域的11个SVP截短体(BjSVP△1～BjSVP△ 11,构建猎物质粒pGADT7-BjSVP△1～pGADT7-BjSVP△11并转化酵母Y187菌;从甘蓝中克隆了BoFLC和BoFLCzq基因,构建诱饵质粒pGBKT7-BoFLC、pGBKT7-BoFLCzq并转化酵母Y2HGold菌.酵母双杂交表明:芥菜BjSVP能与甘蓝BoFLC相互作用,在QDO/X/A培养基上长出蓝色菌落,激活酵母报告基因AUR1-C、HIS3、ADE2、MEL1.截短体BjSVP△2～Bj SVP△5也能与BoFLC相互作用,而BjSvP△7～BjSVP△11不能与BoFLC互作.由此表明BjSVP完整的K域(BjSVP3)可独立作用于BoFLC,但K域亚域(K1、K2、K3)或者连接区(L1、L2)缺失突变后不能介导该作用.作用强度分析表明:BjSVP的Ⅰ域能增强该蛋白互作,但M域和C域可能会干扰该作用;芥菜BjFLC被甘蓝BoFLC或BoFLCzq替换后,可明显增加作用强度;甘蓝FLC的Ⅰ域第20位、K域第65位和C域第32位氨基酸的变异很可能与作用强度相关.

关键词：芥菜、甘蓝、FLC、SVP、截短体、酵母双杂交

所属期刊栏目：40

分类号：S635.1;S637.1(蔬菜园艺)

资助基金：国家自然科学基金项目31000908;国家重点基础研究发展计划项目2012CB113900;重庆市自然科学基金项目2011BA1002;中央高校基本科研业务费专项XDJK2012B020

在线出版日期：2014-02-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：2441-2452