香蕉线条病毒衣壳蛋白功能域基因的原核表达及抗血清制备

摘要：

制备香蕉线条病毒广东分离物(BSV-GD)的抗血清,可为BSV-GD的快速检测和进一步研究BSV编码蛋白的功能提供条件.通过常规分子生物学方法,克隆了BSV-GD衣壳蛋白(Coat protein,CP)功能域基因,构建了该基因的原核表达载体pET28b-CP,并诱导表达了大小约为46.5 kD的融合蛋白His-CP.可溶性分析表明该融合蛋白以包涵体形式存在.利用His标签纯化试剂盒对目的蛋白进行纯化、回收,获得了高纯度的融合蛋白.以纯化的融合蛋白为抗原免疫健康大耳白兔,成功制备了BSV-GDCP功能域基因编码蛋白的兔抗血清.Western-blotting分析表明该抗血清具有很强的特异性,间接ELISA法检测抗血清效价达204 800倍以上,对植物材料的合适检测浓度为1∶1 600～ 1∶6400.

关键词：香蕉、香蕉线条病毒、衣壳蛋白功能域基因、原核表达、抗血清

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分类号：S668.1(果树园艺)

资助基金：公益性农业行业科研专项201203076-07;国家自然科学基金项目30671358

在线出版日期：2014-02-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：2401-2408