瓜类褪绿黄化病毒p22基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

摘要：

以被瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)侵染的甜瓜叶片为供试材料,采用RT-PCR方法克隆其P22蛋白基因,并将其连接到原核表达载体pGex-4T-3上,PCR验证及克隆测序确定开放阅读框的正确性.将重组载体pGexp22转化大肠杆菌BL21菌株,诱导表达,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,p22基因在大肠杆菌BL21中得到了高效表达.以表达的蛋白作为抗原,免疫家兔,制备了CCYV P22的特异性抗血清.ACP-ELISA检测结果表明,血清效价高达1.28×105.Western blot检测甜瓜叶片,结果表明抗血清能够特异性地检测CCYV侵染的甜瓜叶片中的CCYV P22蛋白.

关键词：甜瓜、瓜类褪绿黄化病毒、P22、原核表达、抗血清

所属期刊栏目：40

分类号：S652(瓜果园艺)

资助基金：现代农业产业技术体系建设专项CARS-26-13;NSFC-河南人才培养联合基金项目U1204319

在线出版日期：2013-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：762-766