芥菜开花负调因子SVP及FLC同源互作域筛选和作用强度分析
为探明芥菜开花负调因子SVP、FLC自身聚合的分子机制及其蛋白作用模式,利用酵母双杂交体系,分别对SVP、FLC蛋白自身聚合及其作用强度进行研究.结果表明:酵母菌Y187转化子Y187-pGADT7SVP和Y187-pGADT7SVP2~5均能与酵母菌Y2HGold转化子Y2HGold-pGBKT7SVP融合,并可在选择性固体培养基QDO/X/A上长出蓝色菌落,而Y187-pGADT7SVP1×Y2HGold-pGBKT7SVP不能在QDO/X/A生长.说明SVP蛋白能自身聚合,且与截短体SVP2~5同源结合,SVP蛋白自身聚合需要核心作用域K域参与.尽管MI域不能单独介导SVP自身聚合,但它的存在却能使SVP自身聚合作用增强,C域有可能会削弱该作用.同时,Y2HGold-pGBKT7FLC和Y2HGold-pGBKT7FLC2~5也能与Y187-pGADT7FLC融合,同时激活报告基因AURl-C、HIS3、ADE2、MEL1,FLC能与截短体FLC2~5同源互作.K域是FLC蛋白自身聚合必须的,Ⅰ域会增强这一作用.SVP和FLC的核心作用域K域均由K1、K2和K3亚域组成,形成3个经典的α螺旋,K域有9个高度保守的氨基酸位点及蛋白互作的结构模体(亮氨酸拉链).
芥菜、截短体、SVP、FLC、酵母双杂交
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S637.1(蔬菜园艺)
重庆市自然科学基金项目2011BA1002;国家自然科学基金项目31000908;中央高校基本科研业务费专项XDJK2012B020;国家重点基础研究发展计划973计划项目2012CB113900
2013-08-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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