甜樱桃DELLA蛋白基因PaGAI的克隆与表达分析
利用RT-PCR和RACE技术从甜樱桃（PrunusaviumL．）嫩叶中克隆了赤霉素信号转导途径中的关键负调控因子DELLA蛋白基因cDNA全序列，将其命名为PaGAI。该基因cDNA全长2310bp，开放阅读框ORF为1788bp，推测其编码一个含有595个氨基酸残基的多肽链，蛋白质分子量约64kD。生物信息学分析结果表明，PaGAI编码蛋白具有DELLA蛋白保守结构域，其N端存在两个非常保守的酸性结构域DELLA和VHYNP作为信号感知区域，C端有VHIID、RVER和SAW结构域作为阻遏区域。PaGAI与其它植物的DELLA蛋白具有较高的同源性，其中与苹果MdRGL2b蛋白同源性最高，达到84％。构建pGEX．4T-1／PaGAI原核表达体系，并转化EcoliBL21，经0．5mmol.L^-1IPTG诱导蛋白表达，SDS．PAGE检测获得了分子质量为91kD的融合蛋白，半定量RT-PCR分析表明，PaGAI在花、果实、叶片、韧皮部中普遍表达，在花与韧皮部中的表达远远强于在果实与叶片中的表达。
甜樱桃、DELLA蛋白、基因克隆、原核表达
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S662.5(果树园艺)
国家自然科学基金项目30871696,31171938;公益性行业农业科研专项201003021致谢:本研究承蒙北京市农林科学院林业果树研究所张开春研究员、闫国华副研究员提供试验材料,在此表示感谢
2012-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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