琯溪蜜柚高分量核DNA提取方法的建立
以琯溪蜜柚[Citrus grandis(L.)Osbcck'Guanximiyou']叶片为材料,比较了两种提取方法对高分子量核DNA(HMW-DNA)制备效果的影响.结果表明,改良Zhang法与Petcrson法相比,前者更适合于琯溪蜜柚HMW-DNA的提取.改良Zhang法用温和的物理方法破碎细胞壁,在一定的渗透压下保证细胞核的完整性,运用miracloth和低速离心去除大部分的多糖和细胞壁碎片,经显微观察,所提取的细胞核完整、纯净、质量高;将这些细胞核用低熔点琼脂糖包埋,以琼脂糖小块的方式保存细胞核,以保持核的稳定;琼脂糖小块的最适消化时间为48 h,脉冲场凝胶电泳分析结果表明所获得的HMW-DNA大于1 Mb,这些核DNA能够被限制性内切酶消化,适合于琯溪蜜柚BAC基因组文库的构建.
柚、高分子量核DNA、BAC文库、脉冲场电泳
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S666.3(果树园艺)
国家科技支撑计划项目2007BAD07B01;福建省重大专项前期项目2005NZ1003
2010-09-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
835-840
