砂梨果实ACC氧化酶cDNA克隆及其反义表达载'体构建

摘要：

利用RT-PCR和RACE技术从'早生新水'砂梨成熟果实cDNA中克隆出ACC氧化酶基因保守片段及其5'和3'端,拼接后获得砂梨果实ACC氧化酶eDNA全长.该eDNA全长1225 bp,将其命名为Pyp-ACO,GenBank登录号为EF451060.Pyp-ACO核苷酸序列有一个945 bp的开放读码框,5'端非翻译区为63 bp,3'端非翻译区为217 bp,与西洋梨和苹果的编码区核苷酸序列有较高的同源性,分别为98.3%和98.1%.Pyp-ACO推导编码314个氨基酸,该序列具备非血红素二价铁离子依赖型的氧化/加氧酶类的12个保守氨基酸和催化活性所需的3个氨基酸.将Pyp-ACO编码区序列反向插入pYPX145载体,构建了由双35S启动子所控制的双元表达载体,同时已成功将表达载体导人根癌农杆菌菌株LBA4404,为耐贮藏转基因梨选育奠定了基础.

关键词：砂梨、ACC氧化酶、cDNA、克隆、反义表达载体

所属期刊栏目：35

分类号：S661.2(果树园艺)

资助基金：江苏省高技术研究项目BG2006313;国家高技术研究与发展计划重点项目2006AA100108

在线出版日期：2008-12-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：799-804