双齿围沙蚕诱导型热休克蛋白70基因的克隆及Cu胁迫下的表达分析

摘要：

本研究主要评估了双齿围沙蚕热休克蛋白70(HSP70)基因的分子特征,记录了其对于液态Cu2+胁迫的基因表达情况,并通过测序获得的HSP70cDNA序列与其他沙蚕及无脊椎动物HSP70同源性比对来判定蛋白特性.结果表明:该HSP70基因全长cDNA序列共2161bp,包括5 '非翻译区48 bp,3 '非翻译区142 bp,一个多聚腺苷酸信号序列(AATAAA)和Poly A尾巴以及开放阅读框1971bp.阅读框共编码656个氨基酸,总分子量为71.43 kD,理论等电点为5.15.该氨基酸序列中含有HSP70家族的3个签名序列——IDLGTTYS、IFDLGGGTFDVSIL和IVLVGGSTRIPKIQK,以及细胞质特异性调控基序EEVD,C端重复序列GGMP.同源性分析表明,本研究所获双齿围沙蚕HSP70氨基酸序列与已报道的序列相似性高达94％,与其他无脊椎生物的HSP70相似性也高达79％以上.荧光实时定量PCR分析表明,Cu2+(0.2～5.0mg·L-1)胁迫能够显著诱导沙蚕HSP70 mRNA表达,并于ld后达到峰值.本研究系统描述了双齿围沙蚕HSP70的分子特性,其可被液态Cu2+诱导表达,具备作为环境污染分子生物标记物的潜力.

关键词：双齿围沙蚕、热休克蛋白70、生物信息学分析、基因表达、重金属胁迫

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资助基金：本文由国家自然科学基金项目40801202,31470552、国家“十二五”科技支撑计划项目2012BAC17B04、辽宁省自然科学基金项目20102232和教育部留学回国人员科研启动基金项目资助 This work was supported by the National Natural Science Foundation of China 40801202,31470552,the Key Projects in the National Science & Technology Pillar Program during the Twelfth Five-year Plan Period 2012BAC17B04,the Natural Science Foundation of Liaoning Province 20102232 and the Scientific Research Foundation for the Returned Overseas Chinese Scholars,State Education Ministry.

在线出版日期：2016-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1628-1638