风沙土微生物总DNA不同提取和纯化方法比较

摘要：

为筛选和建立风沙土中总DNA的提取和纯化方法,选取了5种直接提取法、1种间接提取法和2种纯化法分别对风沙土中总DNA进行了提取和纯化,并对其质量和产量进行了比较.结果表明:6种方法均可从风沙土中提取到大小为23 kb左右的总DNA,其中改进后的高盐提取法(用40%聚乙二醇8000和4 mol·L-1 NaCl沉淀DNA)效果最好,纯化后总DNA的纯度最高,可进行16S rDNA的PCR扩增,且产量仅稍低于试剂盒提取法;电泳加柱回收纯化法的纯化效果较好,经该方法纯化后的总DNA大部分可进行PCR扩增,可满足后续分子操作对DNA纯度的要求.

关键词：风沙土、总DNA、提取、纯化、PCR扩增

所属期刊栏目：21

分类号：S154.4(土壤学)

资助基金：国家自然科学基金项目40871247;中央高校基本科研业务费项目N090405010

在线出版日期：2010-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1327-1333