淫羊藿苷调控mTOR/Akt/CREB通路对高糖诱导的足细胞自噬及凋亡的影响

摘要：

目的 探讨淫羊藿苷对高糖诱导的足细胞自噬、凋亡及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)通路的影响.方法 将小鼠足细胞MPC5 分为 5 组:正常对照组(5.5 mmol·L-1葡萄糖)、高糖组(30 mmol·L-1 葡萄糖)、淫羊藿苷组(30 mmol·L-1 葡萄糖+5 μmol·L-1 淫羊藿苷)、GDC-0349 组(30 mmol·L-1 葡萄糖+50 μmol·L-1 GDC-0349)、淫羊藿苷+GDC-0349 组(30 mmol·L-1 葡萄糖+ 5 μmol·L-1淫羊藿苷+50 μmol·L-1 GDC-0349).培养 48h后,噻唑蓝法检测MPC5 细胞活力;吖啶橙染色观察MPC5细胞自噬情况;流式细胞术检测MPC5 细胞凋亡;蛋白印迹法检测MPC5 细胞自噬[微管相关蛋白 1 轻链 3(LC3)Ⅱ、LC3Ⅰ、自噬相关蛋白(Beclin-1)]、凋亡[Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)]和mTOR/Akt/CREB通路相关蛋白的表达.结果 与正常对照组比较,高糖组MPC5 细胞活力、Bcl-2、磷酸化mTOR(p-mTOR)/mTOR、磷酸化Akt(p-Akt)/Akt、磷酸化CREB(p-CREB)/CREB蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),自噬能力增强,自噬体表现出橙色荧光,细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、Bax蛋白表达水平显著升高(P＜0.05).与高糖组比较,淫羊藿苷组MPC5 细胞活力、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、Bcl-2、p-mTOR/mTOR、p-Akt/Akt、p-CREB/CREB蛋白表达水平显著升高,自噬能力进一步增强,自噬体数量增多,自噬体呈现出砖红色荧光(P＜0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平显著降低(P＜0.05);GDC-0349组MPC5 细胞活力、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、Bcl-2、p-mTOR/mTOR、p-Akt/Akt、p-CREB/CREB蛋白表达水平显著降低,自噬能力减弱,自噬体数量减少,自噬体表现出橙色荧光(P＜0.05),细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平显著升高(P＜0.05);淫羊藿苷+GDC-0349 可逆转淫羊藿苷对高糖诱导 MPC5 细胞的作用效果(P＜0.05).结论 淫羊藿苷通过激活mTOR/Akt/CREB通路促进高糖诱导的足细胞自噬抑制细胞凋亡.

关键词：淫羊藿苷、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、蛋白激酶B、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白、高糖、足细胞、自噬、凋亡

所属期刊栏目：43

分类号：R282.71;R965(中药学)

资助基金：河北省医学科学研究课题计划项目20190871

在线出版日期：2024-01-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：19-25