10.3870/j.issn.1004-0781.2015.09.005
17β-雌二醇诱导血管内皮细胞释放一氧化氮的作用机制?
目的:观察17β-雌二醇(E2)诱导小牛胸主动脉内皮细胞(BAECs)快速激活并释放一氧化氮(NO)的时间和浓度依赖性趋势。方法采用24孔平底细胞培养板培养 BAECs 分别进行实验,观察不同浓度 E2诱导 BAECs 快速激活并释放 NO 的浓度依赖性趋势及非基因组机制通路。每次实验均重复3次。使用电子自旋共振波谱法定量测定 NO 的释放;蛋白免疫印迹法检测 BAECs 一氧化氮合成酶(eNOS)磷酸化的水平。结果终浓度为100 nmol?L-1的 E2分别处理 BAECs 1,5,10和15 min 后,NO 的释放量呈现时间依赖性,在10 min 达到高峰;培养液中加入不同终浓度的 E2分别处理 BAECs 10 min后,NO 的释放量和 eNOS 的磷酸化均显示有剂量依赖性,并在终浓度为100 nmol?L-1时达到高峰;培养液中分别加入等体积0.9%氯化钠溶液、100 nmol?L-1 E2和25μg?mL-1放线菌素 D(Act-D)处理 BAECs 10 min 后,NO 释放量分别为(5.38±2.35),(10.59±3.28)和(10.68±3.31) nmol?mg-1;eNOS 的磷酸化水平分别为0.36±0.03,0.98±0.08和0.99±0.08;与经0.9%氯化钠溶液处理比较,经100 nmol?L-1 E2处理后,BAECs 的 NO 释放量和 eNOS 的磷酸化水平均显著增加(均 P<0.05)。结论终浓度为100 nmol?L-1 E2可以通过非基因组机制快速激活血管内皮细胞中 eNOS 的磷酸化水平,进而可以快速合成和释放 NO 发挥其生物学作用,10 min 即可使此效应达到峰值。
雌二醇、内皮细胞、一氧化氮、一氧化氮合成酶
R977.2;R965(药品)
国家自然科学基金资助项目81170767
2015-09-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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