层粘连蛋白γ1基因沉默对膀胱癌细胞增殖及细胞周期的影响

摘要：

目的 探讨层粘连蛋白γ1(LAMC1)在膀胱癌细胞中的表达情况,以及沉默LAMC1 基因表达对膀胱癌细胞增殖和细胞周期的影响.方法 选取河北省邯郸市中心医院 2019 年 1 月至 2021 年 12 月收治的 48 例膀胱癌患者的癌及癌旁组织.采用RT-qPCR法检测UMUC3、T24、5637 及J82 细胞中LAMC1 的mRNA表达水平.将LAMC1-siRNA质粒转染至 5637细胞中,设置LAMC1 沉默组和阴性对照组,RT-qPCR和Western blot验证转染效率;采用CCK-8 法、克隆形成实验、流式细胞术检测LAMC1 基因沉默对膀胱癌细胞增殖、克隆形成能力及细胞周期的影响,Western blot检测细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin D1、p16 和p21 的表达水平.结果 5637 细胞中LAMC1 mRNA表达水平较UMUC3、T24、J82细胞高(P＜0.05).癌旁组织与膀胱癌组织中LAMC1 阳性表达率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).LAMC1沉默组中LAMC1 mRNA和蛋白表达水平低于阴性对照组(P＜0.01).LAMC1沉默组中细胞增殖活力和克隆形成能力低于阴性对照组(P＜0.01).LAMC1沉默组中细胞中S期细胞所占百分比低于阴性对照组(P＜0.01),G1 期细胞所占百分比高于阴性对照组(P＜0.01).LAMC1沉默组中的cyclin D1 和cyclin A蛋白的表达水平低于阴性对照组(P＜0.01),而p16 和p21 蛋白的表达水平高于阴性对照组(P＜0.01).结论 沉默LAMC1 基因表达能够抑制细胞周期相关蛋白的表达从而抑制膀胱癌 5637 细胞增殖能力,提示其可能是膀胱癌潜在的治疗靶点.

关键词：层粘连蛋白γ1、基因表达调控、膀胱肿瘤、细胞增殖、细胞周期

所属期刊栏目：20

分类号：R737.14(肿瘤学)

资助基金：河北省医学科学研究重点课题20181683

在线出版日期：2023-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：18-23