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小檗碱对氧糖剥夺/复氧诱导的大鼠体外血脑屏障损伤的保护作用

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目的 探究小檗碱对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导大鼠体外血脑屏障损伤的保护作用及其机制.方法 将原代培养的大鼠脑微血管内皮细胞(rBMECs)分为对照组、模型组、小檗碱给药组.对照组加入新鲜培养基;模型组和小檗碱给药组给予不同浓度(0、1、3、10、30、100 μmol/L)的小檗碱预孵24 h后更换低糖培养基并将其放在不含氧气的三气培养箱中(95%N2/5%CO2)培养2h(氧糖剥夺,OGD),之后换成新鲜培养基,置于37℃、5%CO2培养箱内继续培养2h(复氧,R).利用MTT法检测细胞存活率,跨膜电阻法测定细胞紧密连接程度,Western blot法检测紧密连接蛋白ZO-1、occludin以及核因子-κB p65(NF-κB p65)的蛋白表达量,ELISA法检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量.结果 与对照组比较,模型组rBMECs细胞存活率、ZO-1表达量、occludin表达量显著降低,跨膜电阻值呈下降趋势,NF-κB p65表达量及IL-1β、TNF-α含量显著升高,差异均有高度统计学意义(均P< 0.01);与模型组比较,小檗碱给药组rBMECs细胞存活率不同程度提高,小檗碱10、30 μmol/L浓度组ZO-1表达量、occludin表达量显著升高,跨膜电阻值显著提高,差异有统计学意义(P<0.05或P< 0.01),同时NF-κB p65表达量及IL-1β、TNF-α含量显著降低,差异均有高度统计学意义(均P<0.01).结论 小檗碱通过抑制NF-κB入核、降低炎性因子释放量、改善OGD/R诱导的rBMECs的损伤,发挥对OGD/R损伤的血脑屏障保护作用.

小檗碱、血脑屏障、核因子-κB p65、炎症

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R285.5(中药学)

中央高校基本科研业务费专项基金项目021414380405

2020-05-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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