RP-HPLC法测定可溶性CD95-Fc融合蛋白中异天冬氨酸的含量

摘要：

目的 测定可溶性CD95-Fc融合蛋白中异天冬氨酸(IsoAsp)含量.方法 采用ISOQUANT(R)异天冬氨酸检测试剂盒结合反相高效液相色谱法测定样品中IsoAsp含量,采用Phenomenex Synergi 4μm Hydro RP-80 C18色谱柱(150 mm×3 mm,4μm),以7.9 mmol/L磷酸二氢钾-1.1 mmol/L磷酸氢二钾-10％甲醇为流动相A,以甲醇为流动相B,梯度洗脱,流速为0.43 mL/min.结果 对照品和3批原液中IsoAsp含量相近(0.30～0.32 mol/molsCD95-Fc),3批成品中IsoAsp含量明显增高(0.51～0.53 mol/mol sCD95-Fc);25℃和37℃处理24h后成品中IsoAsp含量无明显变化,60℃处理后明显增加.结论 该法适用于可溶性CD95-Fc融合蛋白中IsoAsp含量检测,高温处理可加快样品中IsoAsp生成.

关键词：可溶性CD95-Fc、异天冬氨酸、脱酰胺修饰、反相高效液相色谱

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分类号：R914(药物基础科学)

资助基金：国家科技重大专项项目2015ZX09501008-001;中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金课题2017B3

在线出版日期：2019-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：109-112