特异性基因沉默对Machado-Joseph病ATXN3变异表达的抑制作用
目的：利用RNAi技术，观察不同siRNA在体外对Machado-Joseph病变异基因表达的抑制作用，为其应用于临床打下基础。方法本研究分为变异型ATXN3组、野生型ATXN3组及空病毒载体组(对照组)。通过设计针对ATXN3变异基因的特异性siRNA，构建重组型慢病毒载体转染HEK293T细胞，采用Real-time PCR及West-ern blot检测ATXN3 mRNA和蛋白的表达水平，从而对siRNA体外抑制Machado-Joseph病变异基因的效果进行评估。结果 Real-time PCR分析表明，在共转染表达人变异型ATXN3基因和siRNA ATXN3 Mut载体的细胞中，变异型ATXN3组中ATXN3 mRNA的表达较对照组明显下降，差异有统计学意义(P<0.05)，而野生型ATXN3组中ATXN3 mRNA的表达较对照组仅轻微下降，差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot结果表明，与对照组比较，变异型ATXN3组ATXN3蛋白表达被siRNA ATXN3 Mut 1~4明显抑制，差异有统计学意义(P<0.05)，野生型ATXN3组中ATXN3蛋白表达仅被siRNA ATXN3 Mut 1~4轻度抑制。结论特异性siRNA可以选择性沉默变异型ATXN3，说明RNAi是Machado-Joseph病治疗的潜在方向。
Machado-Joseph病、基因沉默、RNA干扰、小干扰RNA、慢病毒载体
R744(神经病学与精神病学)
国家自然科学基金资助项目编号81100879；辽宁省博士科研启动基金资助项目编号20101140。
2014-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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