新型肠道病毒89型结构蛋白VP1的构建表达及序列分析

摘要：

目的 研究克隆表达新型肠道病毒89型VP1结构蛋白,并进行活性鉴定和序列分析.方法 分离肠道病毒89型VP1结构蛋白全基因,克隆入原核表达载体PET-28构建重组质粒pH-VP1,在大肠埃希菌BL21中进行表达,检测表达产物的特异性及活性.将EV89 VP1核酸序列与Genbank数据库中的序列进行比对并建立系统进化树.结果 重组质粒在l mmol/L的IPTG 37℃诱导7h后可诱导表达得到约33 kD的蛋白,经Western Blot实验检测证明表达的融合蛋白具有EV89抗原的活性.分离的EV89病毒其VP1区核酸序列与Genbank数据库中仅有的3株EV89序列同源性分别为86.4％、85.9％、85.6％.结论 成功构建EV89重组蛋白,其表达产物具有良好的特异性及活性,可进一步用于VP1检测方法的研制.进化分析表明,分离的EV89 VP1区与Genbank数据库中其他分离株亲源性较远.

关键词：肠道病毒89型、VP1蛋白、原核表达

所属期刊栏目：10

分类号：R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目3400382

在线出版日期：2014-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：4-6,13