重叠PCR克隆Exendin-4的基因及序列分析

摘要：

目的 克隆Exendin-4 39肽氨基酸序列基因编码区cDNA.方法 根据Exendin-4氨基酸序列编码cDNA,设计正、负向引物/模板链,利用重叠延伸PCR法扩增出Exendin-4编码区基因DNA片段；将获得的基因片段插入pGEM-T-Easy质粒中；转化到大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆,利用限制性内切酶及核苷酸序列分析技术鉴定重组质粒.结果 经质粒DNA酶切分析及序列测定,获得了Exendin-4 DNA片段序列.结论 本研究成功克隆了Exendin--4 cDNA,为下一步构建Exendin-4真核表达载体打下基础,也为Exendin-4基因治疗糖尿病提供了前提条件.

关键词：Exendin-4、重叠延伸PCR、基因克隆

所属期刊栏目：10

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：陕西省科学技术研究发展计划项目编号2011K14-06-04

在线出版日期：2013-08-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：13-15