重组腺苷蛋氨酸合成酶酶促反应条件的研究

摘要：

目的:对重组腺苷蛋氨酸合成酶催化L-蛋氨酸(Met)和三磷酸腺苷(ATP)合成腺苷蛋氨酸的反应条件进行研究.方法:将重组腺苷蛋氨酸合成酶制成粗酶液,对其酶促反应条件进行研究和优化,摸索反应的最适pH值、最适反应时间及最适酶量,解决产物抑制问题和产物分解问题.根据试验摸索的条件进行450L生物反应罐的中试放大.结果:重组腺苷蛋氨酸合成酶催化Met和ATP合成的反应最适pH值为7.0,反应时间为8 h,选择硼酸钠-硫酸缓冲液作为反应的缓冲系统,确定了反应液中酶液的最佳比例为1∶10,解决产物抑制问题的对甲苯磺酸钠的用量为9%,将镁离子和钾离子的盐酸盐形式改为硫酸盐形式,从而保证了最小限度的产物分解.中试放大结果:三批收率分别达到86.8%、87.1%和88.4%.结论:建立了重组腺苷蛋氨酸合成酶酶促反应的方法,为酶促法合成腺苷蛋氨酸大规模生产奠定了基础.

关键词：重组腺苷蛋氨酸合成酶、腺苷蛋氨酸、酶促反应

所属期刊栏目：6

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：北京市高成长企业自主创新科技专项

在线出版日期：2009-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：28-30