10.11969/j.issn.1673-548X.2023.07.020
尿石素A抑制BMMs向破骨细胞分化
目的 探究尿石素 A对小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow derived macrophages,BMMs)向破骨细胞分化的影响.方法 提取小鼠骨髓腔 BMMs,通过 CCK-8 法检测尿石素 A对 BMMs的增殖毒性,使用核因子-κB 受体活化因子配体(recep-tor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)诱导 BMMs向破骨细胞分化并与浓度梯度尿石素 A共培养,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色检测破骨细胞数量和面积大小,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantita-tive polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测破骨分化相关基因水平表达,2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2',7'-Dichlo-rofluorescin diacetate,DCFH-DA)检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.结果 CCK-8 法检测结果显示,尿石素A 在 16μmol/L范围内对BMMs无明显毒性;TRAP染色结果表明,尿石素A显著抑制了BMMs向破骨细胞分化,成熟破骨细胞数目和面积减少(P<0.01);RT-qPCR检测结果显示,尿石素 A 明显抑制了破骨分化相关基因(C-FOS、CTSK、MMP9、ACP5)的相对表达水平(P<0.01);DCFH-DA检测结果显示,尿石素 A 明显降低了 RANKL 诱导的高 ROS 水平.结论 尿石素 A 能抑制 RANKL诱导的 BMMs向破骨细胞分化,并降低分化过程中的 ROS,有望作为骨质疏松治疗的潜在药物.
尿石素A、破骨分化、活性氧
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R68(骨科学(运动系疾病、矫形外科学))
2023-08-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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