10.11969/j.issn.1673-548X.2023.02.012
lncRNA HOTAIR/miR-17-5p/Smad7通路调控激素性股骨头坏死的机制研究
目的 研究lncRNA HOTAIR对激素性股骨头坏死(steroidinduced necrosis of femoral head,SONFH)的影响.方法 收集激素性股骨头坏死患者骨髓组织25例,正常对照组为25例股骨颈骨折患者.培养人骨髓间充质干细胞(hBMSCs),用地塞米松(DEX)培养,CCK-8测定细胞增殖.用HOTAIR过表达载体或miR-17-5p模拟物转染细胞.hBMSCs分为hBMSCs组、hBMSCs+成骨诱导组、hBMSCs+成骨诱导+空载组、hBMSCs+成骨诱导+过表达HOTAIR组、hBMSCs+成脂诱导组、hBMSCs+成脂诱导+空载组和hBMSCs+成脂诱导+过表达HOTAIR组.RT-qPCR测HOTAIR、miR-17-5p、Smad7、RUNX2、RRAR-γ的mRNA表达.Western blot法检测Smad7蛋白的表达.双荧光素酶报告基因测法确认HOTAIR和miR-17-5p间的结合.碱性磷酸酶(ALP)活力检测试剂盒与茜素红染色评估细胞的成骨分化;油红O染色评估细胞的成脂分化.结果 HOTAIR和Smad7在激素性股骨头坏死组织中表达上调,而miR-17-5p表达下调(P均<0.05).双荧光素酶报告实验证实hBMSCs中HOTAIR的直接结合靶点是miR-17-5p,而Smad7是miR-17-5p的靶基因.HOTAIR的过表达诱导了hBMSCs的成脂分化和RRAR-γ表达,并抑制了成骨分化和RUNX2表达(P均<0.05).结论 过表达lncRNA HOTAIR直接靶向miR-17-5p并抑制hBMSCs的成骨分化,还能够促进成脂分化和Smad7的表达.
类固醇、股骨头坏死、miR-17、-5p、成骨分化、成脂分化
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R681.8;R274.9(骨科学(运动系疾病、矫形外科学))
新疆维吾尔自治区自然科学基金2020D01C223
2023-03-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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