柯萨奇B组3型病毒SYBR GreenⅠRT-PCR检测方法的建立

摘要：

目的 建立一种灵敏、特异的柯萨奇B组3型(CV-B3)病原SYBR GreenⅠRT-PCR实时荧光定量检测方法,用于快速、准确地检测CV-B3.方法 设计柯萨奇B组病毒通用引物以及VP1基因的T7启动子特异性引物,以体外转录获得的RNA为标准品,绘制标准曲线,建立CV-B3的荧光定量PCR检测方法;对检测方法的敏感度、特异性、重复性进行评价.结果 该检测方法在10～109拷贝/微升范围内具有良好的扩增效率和线性关系,最低检测限为10拷贝/微升,标准曲线r2=0.999,扩增效率为95.7％;且对柯萨奇病毒A组6型(CV-A6)、柯萨奇病毒A组10型(CV-A10)、肠道病毒71型(EV-71)均无交叉反应,重复性实验变异系数(CV％)<2％.结论 本实验建立的检测方法敏感度较高,同时具备良好的特异性及重复性,可用于CV-B3病原的临床及实验室样本的定性定量检测.

关键词：柯萨奇病毒B组3型;SYBR GreenⅠRT-PCR

所属期刊栏目：51

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目;云南省重大科技专项;昆明市科技创新和服务能力提升计划重点项目

在线出版日期：2022-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：55-59