miR-21a-5p靶向MATN2抑制LPS诱导的巨噬细胞损伤的实验研究

摘要：

目的 miR-21a-5p对脂多糖( LPS)处理的 RAW264. 7 巨噬细胞的调控作用及分子机制研究.方法 实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)检测不同浓度 LPS处理的巨噬细胞中 miR-21a-5p水平;应用 miR -21a-5p模拟物( mimics)和阴性对照( miRNA-NC)分别转染 LPS处理的巨噬细胞,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡比例;ELISA 检测炎性细胞因子水平;TargetScan数据库分析 miR-21a-5p的潜在靶基因,蛋白免疫印迹技术(Western blot法)检测 MATN2 蛋白表达水平;双荧光素酶实验验证 miR-21a-5p 和 MATN2 之间的关系.结果 随着 LPS 处理浓度的增加,miR -21a -5p 水平逐渐降低.miR-21a-5p mimics转染 RAW264. 7 巨噬细胞后 miR-21a-5p水平显著升高.上调 LPS处理的巨噬细胞 miR-21a-5p水平后,细胞活力显著升高,细胞凋亡比例降低;促炎性细胞因子 TNF -α、IL -6 和 IL -1β 水平降低. qRT -PCR 和 Western blot法结果表明,上调 miR-21a-5p水平后,MATN2 蛋白表达和 mRNA 水平明显降低,而下调 miR -21a -5p 水平后,MATN2 蛋白表达和 mRNA明显升高.双荧光素酶报告实验显示 miR-21a-5p靶向 MATN2 的 mRNA的3′ 非编码区(3′ UTR).结论 miR -21a-5p 可以靶向 MATN2 抑制 LPS诱导的巨噬细胞损伤.

关键词：巨噬细胞、miR-21a-5p、MATN2、损伤

所属期刊栏目：50

分类号：R3(基础医学)

资助基金：浙江省医药卫生科技计划2021KY494

在线出版日期：2021-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：55-60,66