PSM B8在人绒毛膜滋养层细胞中对细胞凋亡和自噬的影响

摘要：

目的 初步探讨蛋白酶体亚基PSMB8(proteasome subunit beta 8)对人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/Svneo)凋亡及自噬的影响.方法 将HTR-8细胞分为转染组和对照组,采用瞬时转染的方法分别将PSMB8 siRNA-1、PSMB8 siRNA-2转入转染组中,将NC siRNA转入对照组中.转染48h后用qRT-PCR进行干涉效率验证,CCK-8检测细胞增殖情况,TUNEL和流式细胞术分析细胞凋亡情况,免疫荧光染色检测细胞内caspase-3(cleaved)和LC3蛋白的表达,qRT-PCR检测细胞中自噬相关基因mRNA表达水平.结果 qRT-PCR结果显示,PSMB8 siRNA-1组干扰效果较好.与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组细胞增殖能力减弱,HTR-8细胞中TUNEL(15.05±2.62 vs 33.40±2.44,P=0.000)和caspase-3(cleaved)(21.70±5.87 vs 53.29±10.29,P<0.01)阳性率增加.流式结果显示,与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组存活细胞比例减少(89.10±0.78 vs 77.00±1.68,P=0.000),早期凋亡和晚期凋亡细胞比例增加(9.09±0.65 vs 10.71±0.61,P<0.05),坏死细胞比例也增加(2.49±0.73 vs 12.49±2.02,P<0.01).与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组LC3蛋白阳性细胞率增加(19.02±3.78 vs 31.90±4.87,P<0.05),各自噬相关基因mRNA相对表达水平均上调.结论 在HTR-8细胞中沉默PSMB8基因表达可以诱导细胞凋亡并且激活自噬.

关键词：稽留流产、绒毛膜滋养层细胞、蛋白酶体亚基PSMB8、凋亡、自噬

所属期刊栏目：49

分类号：R714.21(妇产科学)

资助基金：江苏省镇江市社会发展项目;江苏大学"青年英才培育计划"项目

在线出版日期：2020-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：113-118,78