粉防己碱对人视网膜母细胞瘤细胞株S0-Rb50增殖凋亡影响的可能机制研究

摘要：

目的 观察粉防己碱(tetrandrine,Tet)通过磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路对人视网膜母细胞瘤细胞株S0-Rb50增殖及凋亡的影响.方法 对数期生长S0-Rb50细胞分为4组,即对照组、Tet低、中、高剂量组,分别用0、2.5、5.0、10.0μmol/L Tet处理,观察干预24h细胞形态学变化;MTT法检测干预24、48、72h时各组吸光度(A)值;流式细胞术检测干预24h各组细胞周期及细胞凋亡率;实时荧光定量PCR及Western blot法检测干预24h各组细胞PI3K、Akt、B淋巴细胞瘤-@@2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax) mRNA和蛋白表达量及裂解的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)蛋白表达量.结果 倒置相差显微镜观察发现,对照组细胞形态规则、融合成片,不同干预组细胞随Tet浓度升高细胞体积逐渐减小、核质比例减小,不能融合成片,视野内漂浮细胞或细胞崩解碎片增多.与对照组比较,Tet高剂量组干预24h时A值较低,差异有统计学意义(P＜0.05),Tet各剂量组干预48、72h时A值均较低,且随干预剂量升高呈降低趋势,差异均有统计学意义(P＜0.05).对照组MTT试验A值随干预时间的延长呈升高趋势(P＜0.05),Tet高剂量组MTT试验A值随干预时间的延长无明显变化(P＞0.05).与对照组比较,Tet各剂量组Go/G1、S期细胞占比、PI3K、Bcl-2 mRNA和蛋白相对表达量及pAkt/Akt较低,且随干预剂量升高呈降低趋势,差异均有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,Tet各剂量组G2/M期细胞占比、凋亡率、BaxmRNA和蛋白相对表达量及cleaved caspase-3蛋白相对表达量较高,且随干预剂量升高呈降低趋势,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Tet可抑制人视网膜母细胞瘤细胞株S0-Rb50增殖、促进凋亡,可能与抑制PI3 K/Akt信号通路、下调Bcl-2 mR-NA和蛋白、上调Bax mRNA和蛋白及cleaved caspase-3蛋白表达相关.

关键词：人视网膜母细胞瘤、粉防己碱、增殖、凋亡

所属期刊栏目：49

分类号：R739.74(肿瘤学)

资助基金：河南省医学科技攻关计划201602159

在线出版日期：2020-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：117-122,99