10.11969/j.issn.1673-548X.2019.01.013
miR-21降解PTEN影响香烟提取物诱导的PASMCs的增殖与迁移
目的 探讨微小RNA-21(miR-21)的表达对香烟提取物诱导的肺动脉平滑肌细胞中的PTEN/PI3K/AKT通路及增殖与迁移的影响.方法 分离雄性SD大鼠的肺细小动脉平滑肌细胞(PASMC),10% CSE处理PASMCs 24h后分别在PASMCs中转染miR-NC、miR-21、anti-miR-NC、anti-miR-21,通过real-time-PCR检测转染效率.Western blot法检测4组PASMCs增殖及凋亡蛋白PCNA、Bcl-2、caspase-3以及PTEN和相关信号通路中AKT/P-AKT的表达量.通过MTT实验比较4组细胞增殖的变化.用细胞划痕和Transwell实验检测4组细胞迁移能力的变化.结果 转染miR-21组的miR-21表达量与转染miR-NC组的比较表达量上升(P =0.000),而anti-miR-21组的比anti-miR-NC的miR-21表达量下降(P=0.000).在10% CSE处理后,过表达miR-21后抑制了PTEN的表达从而上调了AKT/P-AKT,进而使PCNA和Bcl-2的表达上升,caspase-3的表达被抑制,相反敲降miR-21后PTEN表达上升,AKT/P-AKT活性下降,PCNA以及Bcl-2的表达被抑制,caspase-3表达上升.在10% CSE作用下过表达miR-21后PASMCs的增殖能力显著增强(P<0.01),而敲降miR-21后PASMCs的增殖能力减弱(P<0.01).在10% CSE作用下过表达miR-21后PASMCs的迁移能力增强,而敲降miR-21后PASMCs的迁移能力减弱.结论 miR-21通过负向调控PTEN从而活化PI3 K/AKT信号通路促进了香烟提取物诱导的PASMCs的增殖迁移.
miR-21、香烟提取物、肺动脉平滑肌细胞、PTEN/PI3K/AKT
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R562.1(呼吸系及胸部疾病)
浙江省医药卫生科技计划项目2018KY560
2019-03-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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