10.11969/j.issn.1673-548X.2018.12.020
不同年龄人角化细胞的衰老特征评价
目的 评价年龄对衰老细胞模型的影响,以建立体外培养的衰老细胞模型.方法 本研究根据供者年龄分为4组,每组3例生物学重复,<10岁、10 ~20岁、20~30岁和>30岁组.酶消化法体外分离培养不同年龄供体的表皮角化细胞.体外培养至P2代,进行以下检测:β-半乳糖苷酶染色鉴定衰老细胞数量;CCK-8和克隆形成试验检测细胞生长和增殖能力;磷酸化γ-H2A.X免疫荧光染色检测细胞DNA损伤;Western blot法检测分析细胞中周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白表达.结果 各组衰老细胞数占总细胞数百分比分别为0.864%、0.789%、5.472%、8.765%,差异有统计学意义(P=0.000).随着年龄的增加,HKCs细胞倍增能力下降,倍增时间延长.<10岁组中细胞核Phospho-Histone H2A.X表达细胞数量少,>30岁组人正常角化细胞内DNA双链断裂大量产生.同时,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白2A(CDKN2A/p16INK4a)、p21、p53的表达随年龄增加而上调,差异有统计学意义(P<0.05).结论 正常人角化细胞的增殖与衰老与人类年龄呈显著正相关,可以作为研究人类衰老的细胞模型.
年龄相关衰老、角化细胞、细胞模型、增殖、DNA损伤
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R33(人体生理学)
宁夏回族自治区自然科学基金资助项目NZ15133
2019-02-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
83-87,95